白三葉（Trifolium repens L.）的組織培養及快速繁殖方法是一種現代生物技術手段，旨在通過無性繁殖方式獲得大量遺傳一致的植株，以滿足農業、園藝等領域對優質種苗的需求。該技術不僅能夠提高繁殖效率，還能有效保持母本的優良特性。以下是具體的操作步驟和注意事項：

1. 材料準備

• 外植體選擇：選取健康、無病蟲害的白三葉葉片或莖段作為外植體。幼嫩的葉片或莖尖部分更適合用于組織培養。
• 消毒處理：將外植體先用流動自來水沖洗30分鐘，再用75%乙醇浸泡30秒，接著用0.1%升汞溶液消毒8-10分鐘，用無菌水沖洗3-4次。

2. 培養基配制

• 基礎培養基：常用MS（Murashige and Skoog）培養基作為基礎培養基，可根據需要調整激素濃度。
• 激素添加：
  • 誘導愈傷組織：在基礎培養基中加入2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）0.5-1.0 mg/L 和6-BA（6-芐氨基嘌呤）0.5-1.0 mg/L。
  • 分化不定芽：在基礎培養基中加入6-BA 1.0-2.0 mg/L 和NAA（萘乙酸）0.1-0.5 mg/L。
  • 生根培養：在基礎培養基中加入IBA（吲哚丁酸）0.5-1.0 mg/L 或NAA 0.5-1.0 mg/L。

3. 外植體接種與培養

• 接種：將消毒后的外植體切成小塊（約0.5 cm2），接種到誘導愈傷組織的培養基上，每瓶接種3-5個外植體。
• 培養條件：將接種后的培養瓶置于培養室內，溫度控制在25±2℃，光照強度為1500-2000 lx，光照時間為16小時/天。

4. 愈傷組織誘導與分化

• 愈傷組織誘導：約2-4周后，外植體表面開始形成愈傷組織?？蓪⒂鷤M織轉移到分化不定芽的培養基上。
• 不定芽分化：繼續培養2-3周，愈傷組織逐漸分化出不定芽。當不定芽長至1-2 cm時，將其剪下并轉移至生根培養基上。

5. 生根與煉苗

• 生根培養：將分化出的不定芽轉移到生根培養基上，繼續培養2-3周，直至不定芽長出根系。
• 煉苗：將帶有根系的幼苗從培養瓶中取出，用無菌水輕輕洗去根部的培養基，然后移栽至溫室或育苗盤中，逐步適應自然環境。

6. 移栽與管理

• 移栽：將煉苗后的幼苗移栽至營養土中，保持土壤濕潤，避免強光直射。
• 管理：定期澆水、施肥，注意防治病蟲害，確保幼苗健康成長。

注意事項

• 無菌操作：整個過程中需嚴格遵守無菌操作規程，防止污染。
• 激素濃度：不同品種的白三葉對外源激素的敏感性可能有所不同，需根據實際情況調整激素濃度。
• 光照與溫度：培養過程中應保持穩定的光照和溫度條件，以促進愈傷組織的形成和不定芽的分化。

通過上述步驟，可以高效地進行白三葉的組織培養和快速繁殖，為農業生產提供優質的種苗資源。

品名：白三葉種子

特點：喜歡涼爽氣候，生長快，抗性好。

種植量：10~15kg/畝

種植期：春秋/視地區而定

適播地：排水通暢，光照充足，不挑土壤。

自然高度：25~40cm

供應規格：種子/盆栽